细胞因子受體(tǐ)样因子2(CRLF2)的编码产物(wù)，可(kě)与IL-7Ra形成异二聚體(tǐ)，接收并传递来自胸腺基质淋巴细胞生成素的信号;CRLF2表达上调可(kě)以激活JAK/STAT信号通路或PI3K/mTOR信号通路，从而促进白血病的发生和发展。既往研究表明，CRLF2过表达是费城染色體(tǐ)(Ph)样B细胞急性淋巴细胞白血病(B-ALL)的主要特征，约50-60%的Ph样B-ALL患者存在CRLF2过表达。但CRLF2过表达在B-ALL预后中的预测价值仍存在争议。基于此，南方医科(kē)大學(xué)珠江医院杨丽华教授团队开展了一项回顾性研究评估了CRLF2表达水平在B-ALL患儿中的预后意义。

研究方法

该回顾性研究纳入了2020年5月-2022年2月就诊于南方医科(kē)大學(xué)珠江医院儿科(kē)的111例B-ALL患儿。随访截止于2023年8月25日。1岁前确诊為(wèi)B-ALL的患儿(n=5)接受了Inerfant-06方案治疗。在1岁后确诊的患儿中，1例最初在另一家医院接受间歇性治疗，1例接受广东地區(qū)儿童急性淋巴细胞白血病化疗协作组2008方案(GDALL-2008)，其余104例接受华南地區(qū)儿童ALL治疗协助组2016化疗方案(SCCLG-ALL2016)。研究者使用(yòng)公共数据库中的TARGET研究队列作為(wèi)外部验证队列，最终纳入了144例B-ALL且具有(yǒu)RNA测序结果的患者。

研究结果

患者临床特征

于2020年5月-2022年2月就诊于南方医科(kē)大學(xué)珠江医院儿科(kē)的111例初诊B-ALL患儿最终纳入了该研究(简称，珠江队列)。中位随访时间為(wèi)28.6(95%CI：27.6-32.1)个月。在所有(yǒu)患者(n=111)中，男性67例(60%)，女性44例(40%)，中位年龄為(wèi)4(0-14)岁，≤6岁81例(73%)，>6岁30例(27%)。依据SCCLG-ALL-2016危险分(fēn)层，13例(12%)标危，36例(32%)中危，61例(55%)高危，1例(1%)因放弃治疗而未完成风险评估。对于B-ALL的分(fēn)子分(fēn)型结果，具體(tǐ)如下：DUX(n=4，4%)、ETV6-RUNX1(n=12，10%)、ETV6-RUNX1样(n=2，2%)、高超二倍體(tǐ)(n=38，33%)、KMT2A(n=9，8%)、低亚二倍體(tǐ)(n=1，1%)、MEF2D(n=4，4%)、NUTM1(n=2，2%)、PAX5P80R(n=1，1%)、PAX5alt(n=5，5%)、Ph+(n=4，4%)、Ph样(n=5，5%)、TCF3-PBX1(n=11，10%)、ZNF384(n=1，1%)和未分(fēn)类(n=13，12%)。具體(tǐ)临床特征见表1。

表1.珠江队列患儿的临床特征

CRLF2表达水平高的患者特征

珠江队列所有(yǒu)患儿在治疗均进行了骨髓样本的RNA测序，结果表明CRLF2基因表达水平普遍较低(FPKM值<1)。但一些患儿CRLF2表达水平高，CRLF2高表达的患儿主要為(wèi)以下亚型：KMT2A、Ph+、Ph样和高超二倍體(tǐ)。

尽管Ph+和Ph样患儿间的基因表达谱相似，但CRLF2基因表达水平不相同。此外，Ph样和高超二倍體(tǐ)患儿的CRLF2基因表达水平显著高于其他(tā)亚型(Ph样，P=0.021;高超二倍體(tǐ)，p<0.001);Ph+与CRLF2表达水平间没有(yǒu)显著相关性。依据CRLF2表达水平，研究者将患儿分(fēn)為(wèi)了CRLF2低、中和高组。CRLF2高、中、低组的患儿比例分(fēn)别為(wèi)6%(Ph样，n=3;高超二倍體(tǐ)，n=1;Ph+，n=1;KMT2A，n=1)，42%(高超二倍體(tǐ)，n=31;Ph样，n=1;其他(tā)亚型，n=15)和52%(其他(tā)亚型，n=48;高超二倍體(tǐ)，n=6;Ph+，n=3;Ph样，n=1)。

对于CRLF2低、中、高组患儿临床特点，确诊时三组的骨髓原始细胞比例没有(yǒu)显著差异，但CRLF2高的患儿略高于低组(CRLF2高 vs 低，p=0.036;Kruskal-Wallis，p=0.06)。CRLF2高的患儿初次就诊时白细胞计数显著高于另外两组(CRLF2高 vs 低，p=0.016;CRLF2高 vs CRLF2中，p=0.016，Kruskal-Wallis，p=0.042)。此外，CRLF2高的患儿微小(xiǎo)残留病(MRD)转阴较慢，具體(tǐ)结果见图1C。

图1.CRLF2低、中、高组的骨髓原始细胞比例(A)，白细胞绝对值(B)和MRD水平结果(C)

CRLF2表达水平与预后的关系

為(wèi)进一步验证CRLF2表达水平与预后的关联，研究者采用(yòng)公开的TARGET队列作為(wèi)外部独立验证队列。依据珠江队列获取的CRLF2表达水平分(fēn)层临界值，研究者依据CRLF2表达水平的FPKM值对TARGET队列中的患者进行分(fēn)层，并进行后续生存分(fēn)析。由于珠江医院队列只招募了年龄≤15岁的患儿，而TARGET队列中患者年龄范围為(wèi)2-30岁，因此年龄被纳入至多(duō)因素Cox回归分(fēn)析中。结果表明，年龄和CRLF2分(fēn)层均是无事件生存期(EFS)和总生存期(OS)的独立预后因素(EFS：C指数=0.61，p<0.001;OS：C指数=0.64，p=0.03)。年龄>15岁是EFS和OS的危险因素(EFS：HR=1.79，95%CI：1.03-3.10，p=0.037;OS：HR=2.74，95%CI：1.18-6.4，p=0.019)。CRLF2中不是EFS危险因素，而是保护因素(HR=0.52，95%CI：0.35-0.78，p=0.002)，而CRLF2高是OS危险因素(HR=4.33，95%CI：1.2015.6，p=0.025)，具體(tǐ)结果见图2A和B。

在不考虑年龄对预后影响的情况下，CRLF2高和低的患者的EFS明显低于CRLF2中，具體(tǐ)见图2C。CRLF2高组的OS明显短于CRLF2低和中组患者，具體(tǐ)见图2D。研究者依据年龄，将TARGET队列中≤15岁的患者选作儿童组，得到了相似结果，CRLF2高组患者预后显著较差，具體(tǐ)数据见图2E和2F。

图2.多(duō)因素COX回归分(fēn)析结果(A，EFS;B，OS);TARGET队列中CRLF2低、中、高组患者的EFS(C)和OS(D)结果;TARGET队列中儿童亚组的CRLF2低、中、高组EFS(E)和OS(F)结果

研究结论

该回顾性研究表明，CRLF2基因表达上调主要在KMT2A、Ph+、Ph样和高超二倍體(tǐ)亚型的B-ALL患儿中，且通过外部验证队列证明CRLF2基因表达上调与B-ALL预后差显著相关。CRLF2基因表达水平高的患儿，可(kě)能(néng)需要强化化疗或将经典治疗与新(xīn)型疗法相结合，来改善预后。